Magnesium chloride for PCR, ROX additive & gel loading buffer

Magnesium chloride (MgCl2) cấp độ dùng cho PCR được sử dụng để tối ưu hóa nồng độ ion Mg2+ trong các phản ứng PCR và qPCR. Dung dịch phụ gia ROX cho qPCR thường được sử dụng nhất như một chất nhuộm tham chiếu thụ động (passive reference dye) nhằm giảm thiểu sự biến thiên tín hiệu huỳnh quang giữa các giếng trong quá trình thu thập dữ liệu Real-time PCR. Đệm nạp mẫu 6x (6x Sample Loading Buffer) của chúng tôi là dung dịch nạp gel chứa hai loại thuốc nhuộm chỉ thị, cho phép theo dõi quá trình di chuyển của DNA trong quy trình điện di trên gel.

Đặc tính nổi bật

• Độ tinh khiết cấp độ PCR (PCR Grade): Đảm bảo độ đặc hiệu và hiệu suất cao trong các ứng dụng PCR.

• Sẵn sàng sử dụng (Ready-to-Use): Các dung dịch được chuẩn bị sẵn để tích hợp ngay lập tức vào quy trình làm việc.

• Nồng độ linh hoạt: Phù hợp cho nhiều thiết lập PCR và qPCR khác nhau.

• Lý tưởng để phát triển các xét nghiệm tùy chỉnh (custom assay).

• Thay thế các thành phần trong bộ kit với chi phí hợp lý.

Ứng dụng

• Các xét nghiệm PCR và qPCR tiêu chuẩn.

• Phản ứng Multiplex PCR (PCR đa mồi).

• Điện di trên gel.

• Phân tích các đoạn cắt giới hạn (Restriction fragment analysis).

Dung dịch Magnesium Chloride (Cấp độ PCR):

Được tối ưu hóa cho các phản ứng PCR, dung dịch Magnesium Chloride của chúng tôi đảm bảo sự khuếch đại nhất quán và hiệu quả trong các ứng dụng PCR tiêu chuẩn và đa mồi. Sản phẩm được cung cấp ở dạng sẵn sàng sử dụng, giúp tăng cường hoạt tính của enzyme và độ đặc hiệu khuếch đại với vai trò là một đồng yếu tố (co-factor) bắt buộc của các enzyme thao tác trên DNA, bao gồm cả DNA polymerase. Dung dịch 50 mM này được dùng để tối ưu hóa nồng độ ion Mg2+ trong các phản ứng PCR và qPCR.

Các bộ kit và hỗn hợp mix của PCR Biosystems đã được cung cấp sẵn nồng độ MgCl2 tối ưu và thường không cần bổ sung thêm. Tuy nhiên, một số xét nghiệm có thể yêu cầu tùy chỉnh thêm. Nồng độ magie lý tưởng trong từng phản ứng phụ thuộc vào mẫu khuôn, hệ đệm và dNTPs. Việc bổ sung thêm cần được chuẩn độ (titrate) cẩn thận và so sánh hiệu suất với phản ứng ban đầu không điều chỉnh.

Dung dịch phụ gia ROX (Chất nhuộm tham chiếu thụ động cho qPCR):

Cho phép chuẩn hóa (normalization) dữ liệu Real-time PCR chính xác. Phụ gia ROX của chúng tôi là một hợp chất liên hợp ổn định của 5-carboxy-X-rhodamine ester, được sử dụng làm chất nhuộm tham chiếu thụ động để chuẩn hóa tín hiệu huỳnh quang và hiệu chỉnh sự biến thiên giữa các giếng trong Real-time qPCR. Thuốc nhuộm được cung cấp ở nồng độ 50 μM, có thể dùng làm dung dịch gốc (stock) 100x cho các thiết bị yêu cầu nồng độ ROX cao (500 nM) và làm dung dịch gốc 1000x cho các thiết bị yêu cầu nồng độ ROX thấp (50 nM).

PCR Biosystems cung cấp hầu hết các sản phẩm qPCR ở dạng trộn sẵn (premixed), ống riêng biệt hoặc công thức không chứa ROX (no-ROX) để tối ưu sự tiện dụng. Sản phẩm này được dùng khi cần bổ sung thêm ROX hoặc để phát triển các xét nghiệm thiết kế riêng (bespoke assays).

Đệm nạp gel (6x Sample Loading Buffer):

Hỗ trợ quan sát mẫu DNA/RNA chính xác và hiệu quả với Đệm nạp gel 6x được thiết kế cho các quy trình điện di. Đệm này chứa xylene cyanol, bromophenol blue và glycerol để quan sát vạch (band) sắc nét và giữ acid nucleic trong giếng khi thiết lập thí nghiệm điện di. Sản phẩm phù hợp cho cả gel agarose và polyacrylamide, tương thích với tất cả các hóa chất PCR điểm cuối (endpoint) của PCR Biosystems và các sản phẩm PCR tiêu chuẩn từ các nhà cung cấp khác vốn chưa có sẵn thuốc nhuộm nạp gel (ví dụ: các dòng PCRBIO Red Mixes). Hai loại thuốc nhuộm chỉ thị sẽ di chuyển tương ứng tại các vị trí khoảng 150 bp và 800 bp trên gel agarose TAE 2%, hoặc tại khoảng 500 bp và 4.000 bp trên gel agarose TAE 1%.